Electrochemical immunosensing of low-density lipoprotein based on sol-gel encapsulation

Abstract Lipoprotein monitoring is desirable in the management of medical conditions such as atherosclerotic cardiovascular disease and coronary artery disease, in which controlling the concentration of these chylomicrons is crucial. Current clinical methods are complex and present poor reproducibility between laboratories. For these reasons, recent guidelines discard the assessment of low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) as a routine analysis during lipid-lowering therapies. Concerning the importance of monitoring this parameter, the authors present an electrochemical immunosensor constructed from a simple and easy-to-reproduce platform that allows detecting and quantifying LDL nanoparticles directly from human serum samples. The performance of the biosensor was studied by scanning electron microscopy, cyclic voltammetry, and electrochemical impedance spectroscopy. The biosensing platform displays good stability and linearity between 30 mg dL-1 and 135 mg dL-1 with a detection limit of 20 mg dL-1. The proposed biosensor can be easily employed for monitoring LDL concentration in clinical treatments.

Influence of weight gain on the lipid profile of adolescents / Influencia de la ganancia de peso sobre el perfil lipídico en adolescentes

The objective of this study was to assess the influence of weight gain on the lipid profile of 135 adolescents between 10 - 14 years at baseline and 15 - 19 years at follow-up, enrolled in public schools in Recife, Brazil. The results showed that a BMI z-score correlated with triglycerides (TG) and with high density trigliceride lipopoteine ratio (TG/HDL-c) in males. In females, high z-score correlated with total cholesterol (TC) and low density lipoprotein (LDL-c). In males, for each unit increase in z-score, TG increased by 14.7 mg/dL and the TG/HDL-c ratio increased by 0.4. Among females, TC increased by 9.4 mg/dL, LDL-c increased by 11.6 mg/dL, non-HDL cholesterol increased by 11.8 mg/dL, and HDL-c decreased by 2.3 mg/dL. In males, excessive weight gain was associated with an increase in TG and TG/HDL-c; in females, it was associated with a higher increase in TG/HDL-c and non-HDL cholesterol. However, z-score variation can be a good predictor of lipid profile changes, even in those that are within the normal range.

El objetivo de este estudio fue evaluar la influencia del aumento de peso en el perfil lipídico de 135 adolescentes de edades entre 10 y 14 años de edad al inicio del estudio y de 15 a 19 años en el seguimiento. Los adolescentes pertenecían a escuelas públicas de Recife, Brasil. Los resultados mostraron que el alto puntaje z de indice de masa corporase (IMC) correlacionaba con triglicéridos (TG) y con relación de triglicéridos con lipoproteínas de alta densidad (TG/HDL-c) en los hombres. En las mujeres, puntaje z de IMC se correlacionó con CT y lipoproteína de baja densidad (LDL-c). En los hombres, por cada unidad de aumento en el puntaje z, los TG aumentaron en 14,7 mg/dL y la relación TG / HDL-c aumentó en 0,4; en las mujeres, el CT aumentó en 9,4 mg/dL, el LDL-c aumentó en 11,6 mg/dL, el colesterol no HDL aumentó en 11,8 mg / dL y el HDL-c disminuyó en 2,3 mg/dL. En los hombres, el aumento de peso excesivo se asoció con un aumento de TG y TG/HDL-c; en las mujeres, con un aumento mayor en TG/HDL-c y colesterol no HDL. Sin embargo, la variación z-score puede ser un buen predictor de cambios en el perfil lipídico, incluso en aquellos que se encuentran dentro del rango normal.

Estudos da atividade do receptor da LDL em pacientes com Hipercolesterolemia Familial / Studies of LDL receptor activity in patients with familial hypercholesterolemia

A hipercolesterolemia familial (HF) é uma doença autossômica dominante considerada como uma das formas mais graves de hiperlipidemia, assim como, a principal causa de morbi-mortalidade por ser o principal fator desencadeante da aterosclerose. A alteração primária e mais freqüente da HF incide no gene do receptor da LDL (LDLr), sabe-se que mais de 1600 mutações são descritas na literatura e a principal consequência dessas alterações resultam no comprometimento da remoção da LDL, aumentando a concentração plasmática. Atualmente, o ultrasequenciamento genômico permite gerar muitos dados, que podem identificar novas mutações gênicas de forma eficiente, reprodutiva e rápida. No entanto, somente a validação da nova mutação por atividade funcional pode realmente estabelecer a associação com a doença. O presente estudo tem como objetivo realizar a análise da atividade do receptor da LDL, identificadas através do sequenciamento de alto rendimento, no gene LDLr realizado pelo nosso grupo de pesquisa e correlacionar com dados clínicos, in vitro, in silico e estrutural. Para cumprir esta meta, os linfócitos T dos portadores de HF foram isolados do sangue periférico, cultivados e submetidos a estímulo para a expressão de receptores da LDL, incubados com LDL marcada para avaliação de ligação e interiorização pelas células de cada paciente. Dos 30 pacientes selecionados para esse estudo, 63% apresentaram mutação no LDLR, sendo que quase todas as variantes (p.Gly373Asp, p.Asp601His, p.Ile488Thr, p.Gly549Asp, p.Gly592Glu e Gly681Asp) são localizadas no segundo domínio entre os éxons 7 ao 14. De acordo com o docking molecular a variante p.Gly592Glu (rs137929307), que já foi identificada na população polonesa, espanhola e brasileira, já relacionada com a HF, pode aumentar a interação do LDLr com a ApoB e consequentemente o modo de interação entre as proteínas, no estudo in vitro foi possível notar um aumento tanto na média de fluorescência da ligação e da ligação e interiorização em relação a quantidade de LDLr na superfície celular

Familial hypercholesterolemia (HF) is an autosomal dominant disease considered as one of the most severe forms of hyperlipidemia, as well as the main cause of morbidity and mortality because it is the main triggering factor for atherosclerosis. The primary and more frequent alteration of the HF affects the LDL receptor gene (LDLr), it is known that more than 1600 mutations are described in the literature and the main consequence of these alterations results in the compromise of the LDL removal, increasing the plasma concentration. Nowadays, genomic ultrasequencing allows the generation of many data, which can identify new gene mutations efficiently, reproductively and rapidly. However, only the validation of the new functional activity mutation can actually establish association with the disease. The aim of the present study was to analyze LDL receptor activity, identified by high-throughput sequencing, in the LDLr gene performed by our research group and to correlate with clinical, in vitro, in silico and structural data. To meet this goal, the T lymphocytes from the HF carriers were isolated from the peripheral blood, cultured and challenged for the expression of LDL receptors, incubated with labeled LDL for binding assessment and internalization by the cells of each patient. Of the 30 patients selected for this study, 63% had a mutation in LDLR, and almost all variants (p.Gly373Asp, p.Asp601His, p.Ile488Thr, p.Gly549Asp, p.Gly592Glu and Gly681Asp) are located in the second domain between exons 7 to 14. According to the molecular docking the variant p.Gly592Glu (rs137929307), which has already been identified in the Polish, Spanish and Brazilian population, already related to HF, can increase the interaction of LDLr with ApoB and consequently the mode of interaction between proteins, in the in vitro study it was possible to note an increase in both the mean fluorescence of binding and binding and internalization in relation to the amount of LDLr on the cell surface

Usefullnes of atherogenic indices and Ca-LDL level to predict subclinical atherosclerosis in patients with psoriatic arthritis?

Abstract Background: To investigate the link between carbamylated low-density lipoprotein (ca-LDL), atherogenic index of plasma (AIP), atherogenic coefficient (AC), Castelli's risk indices I and II (CRI I and II) and subclinic atherosclerosis in psoriatic arthritis (PsA). Methods: Thirty-ninepatients and 19 age, sex, body mass index matched healthy controls were included. Insulin resistance (IR) was assessed with homeostasis of model assessment-IR (HOMA-IR). Carotid intima-media thickness (CIMT) was measured at both common carotid arteries and mean CIMT was calculated. Results: The mean age was 49.50 ± 11.86 years and 64.1% were females in PsA group. In the PsA group, CIMT and HOMA-IR were significantly higher (p = 0.003, p = 0.043, respectively). AIP, AC, TG/HDL, CRI-1, CRI-2 and ca- LDL levels were similar between groups. In PsA group, CIMT was positively correlated with HOMA-IR, TG/HDL and AIP. Although ca-LDL was positively correlated with serum amyloid A (r = 0.744, p <0.001), no correlation was detected between ca-LDL and CIMT (r =0.215, p = 0.195). PsA patients with IR tended to have higher ca-LDL levels than patients without IR, but this difference lacked statistical significance (33.65 ± 26.94, 28.63 ± 28.06, respectively, p = 0.237). Conclusions: A significant increase in CIMT was seen in PsA patients without clinically evident cardiovascular disease or any traditional atherosclerosis risk factors. CIMT was correlated with HOMA-IR, TG/HDL and AIP.

Dieta cetogênica clássica e modificada: risco cardiometabólico e potencial terapêutico em pacientes pediátricos com epilepsia refratária / Classic and modified ketogenic diet: cardiometabolic risk and therapeutic potential in pediatric patients with refractory epilepsy

A dieta cetogênica (DC) é um tratamento não farmacológico prescrito especialmente para crianças e adolescentes com epilepsia refratária. A composição da dieta cetogênica é baseada no alto teor de gorduras, baixo teor de carboidratos e teor proteico moderado, sendo a produção de corpos cetônicos o mecanismo provável envolvido no controle das crises epilépticas. Apesar dos benefícios clínicos, a relação entre DC e o risco cardiometabólico não está bem estabelecida, especialmente sob os fatores de risco não clássicos. Objetivo: comparar os efeitos da dieta cetogênica clássica com a dieta cetogênica modificada nas subfrações de LDL e HDL, nos marcadores oxidativos, no perfil de apolipoproteinas e no perfil lipídico de crianças e adolescentes com epilepsia refratária, além do efeito clínico no controle da epilepsia. Métodos: Estudo de intervenção com recrutamento de crianças e adolescentes com epilepsia refratária de 1 a 19 anos de ambos os sexos do Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da FMUSP. O grupo controle recebeu DC clássica e o grupo caso recebeu a DC modificada com redução em pelo menos 20% de ácidos graxos saturados (AGS) e redução da relação w6/w3 em pelo menos 50% em comparação a DC clássica. Para ambos os grupos foram analisados os seguintes parâmetros bioquímicos no período basal, após 3 meses e 6 meses de DC: perfil lipídico clássico, concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNEs), substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs), subfrações de lipoproteina de baixa densidade (LDL) e lipoproteína de alta densidade (HDL), e perfil de apolipoproteínas (APOA-I e APOB). Além da avaliação clínica, antropométrica e de consumo alimentar. Resultados: A redução de crises e dos fármacos antiepilépticos foi semelhante entre os grupos. O aumento na concentração de colesterol total (CT) e LDL foi inferior no grupo caso, a Não-HDL manteve-se significativamente menor no grupo caso em comparação ao grupo controle e a relação LDL/APOB foi superior no grupo controle após 6 meses de DC. O percentual de partículas pequenas de LDL apresentou aumento superior em 208% no grupo controle comparado ao grupo caso, e consequentemente o tamanho de LDL apresentou maior redução no grupo controle. A incidência de dislipidemia foi significativamente inferior no grupo caso considerando os pontos de corte para LDL (>=130 mg/dL) e não-HDL (>=145 mg/dL). Não houve diferença entre os grupos na concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNES) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs). Conclusão: A mudança do perfil de gorduras 10 contribuiu para melhora das concentrações de marcadores de risco cardiometabólico (CT, LDL e LDL pequenas) e consequentemente, perfil mais cardioprotetor nos pacientes do grupo caso

The ketogenic diet (KD) is a non-pharmacological treatment especially prescribed to children and adolescentes with refractory epilepsy. The composition of the ketogenic diet is based on the high fat, low carbohydrate and moderate protein. The production of ketone bodies is the probable mechanism involved in the control of epileptic seizures. Despite the clinical benefits, the relationship between KD and cardiometabolic risk is not well established, especially under non-classical risk factors. Objective: to compare the effects of the classical KD with the modified KD on the LDL and HDL subfractions, in oxidative biomarkers, in apolipoprotein profile and lipid profile of children and adolescentes with refractory epilepsy, as well as the clinical effect on control of seizure. Methods: Dietary intervention study with recruitment of children and adolescentes with refractory epilepsy aged 1 to 19 years of both sexes from the Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP. The control group received classical KD and the case group received modified KD with a reduction of at least 20% saturated fatty acids (SFA) and a reduction of the w6/w3 ratio by at least 50% compared to classic KD. For both groups, the following biochemical parameters were analyzed at baseline and after 3 and 6 months of the KD: classical lipid profile, concentration of non-esterified fatty acids (NEFAs), thiobarbituric acid reactive substances (TBARs), low density lipoprotein (LDL) and high density lipoprotein (HDL) subfractions, size LDL, and apolipoprotein profile (APOA-I and APOB). In addition to clinical, anthropometric and food consumption assessment. Results: The reduction of seizures and antiepileptic drugs was similar between the groups. The increase in total cholesterol (TC) and LDL levels was lower in the case group, non-HDL remained significantly lower in the case group compared to the control group and the LDL/APOB ratio was higher in the control group after 6 months of KD. The percentage of small LDL particles showed a 208% higher in the control group than case group. Consequently, the LDL size showed a greater reduction in the control group. The incidence of dyslipidemia was significantly lower in the case group considering cut-off points for LDL (>=130 mg/dL) and non-HDL (>=145 mg/dL). There was no difference between the groups in the NEFAs and TBARs levels. Conclusion: The change in the fatty acids profile contributed to improvement the concentrations of cardiometabolic risk markers (TC, 12 LDL and small LDL), and consequently, a more cardioprotective profile in the patients of case group

Exposição aos níveis de colesterol ao longo da vida e doença coronariana / Lifetime exposure to cholesterol evels and coronarysrtery disease disease

A doença aterosclerótica compreende amplo espectro de entidades clínicas com envolvimento genético e ambiental. A exposição ao longo da vida a níveis elevados de colesterol e de sua fração LDL determinam um limiar a partir do qual a doença aterosclerótica se desenvolve. Assim, nas formas genéticas de dislipidemias, como a hipercolesterolemia familiar, a idade do aparecimento da doença aterosclerótica vai depender da carga cumulativa de exposição aos níveis de LDL-colesterol, sendo tanto mais precoce quanto maiores os níveis de LDL-colesterol e a presença de fatores de risco adicionais, e mais tardia na ausência destes, e no sexo feminino. A prevenção ao longo da vida parece ser extremamente efetiva, e a avaliação individual com a implementação de medidas preventivas precoces e terapêuticas deve ser estimulada. Assim, parece lógico que reduções de colesterol, por mudanças no estilo de vida ou pelo uso de fármacos na adolescência e ao longo da vida apresentem inestimável benefício para a redução dos desfechos cardiovasculares na vida adulta

The atherosclerotic process comprises a broad spectrum of clinical entities, with genetic and environmental involvement. Lifetime exposure to high levels of cholesterol and LDL-cholesterol determine a trigger that can lead to the development of atherosclerotic disease. Therefore, in genetic forms of dyslipidemia, such as familial hypercholesterolemia, the age of onset of atherosclerotic disease will depend on the cumulative burden of exposure to LDL-cholesterol levels, being earlier with higher levels of LDL-cholesterol, the presence of other risk factors and later, in the absence of risk factors, and in females. Prevention throughout life appears to be extremely effective, and individual assessment, with the implementation of early preventive measures, should be encouraged. Thus, it seems logical that cholesterol reductions, changes in lifestyle, or the use of specific medications in adolescence and throughout life present inestimable benefit in reducing cardiovascular outcomes in adulthood

Papel do ômega-3 nas características físico-químicas da HDL e LDL e possível associação com medidas Z-scan em indivíduos adultos / Role of omega-3 on HDL and LDL physicochemical characteristics and possible association with Z-scan measurements in adults

Introdução: O aumento na prevalência das doenças cardiovasculares alerta para a necessidade de estratégias eficazes e de baixo custo como medidas preventivas na redução dos fatores de risco, morbidades e óbitos decorrentes de eventos coronarianos. As modificações no estilo de vida são as primeiras alternativas a serem adotadas. Nesse contexto, a dieta ocupa lugar de destaque e os benefícios dos ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 na saúde cardiovascular são amplamente reconhecidos. As doenças cardiovasculares são influenciadas por diversos fatores de risco e o desequilíbrio na concentração plasmática das lipoproteínas é um fator de risco independente no desenvolvimento da doença cardiovascular aterosclerótica. Entretanto, há evidências de que as subfrações lipoproteicas podem influenciar o risco cardiovascular de maneira diferenciada, dependendo das características físico-químicas e funcionalidade de cada partícula. O desenvolvimento de novas técnicas, capazes de identificar esses parâmetros, tem sido foco de grande interesse científico. Objetivo: Avaliar o papel do ômega-3 sobre as características físico-químicas da LDL e HDL e possível associação entre medidas Z-scan e marcadores cardiometabólicos em indivíduos adultos. Metodologia: A partir de uma subamostra do estudo CARDIONUTRI (estudo clínico, randomizado, controlado e duplo cego com seguimento de 8 semanas) foram selecionados 36 indivíduos do Grupo Ômega-3 (3,0g/dia de óleo de peixe - 1,11g de EPA + 0,69g de DHA) e 27 do Grupo Placebo (3,0g/dia de óleo mineral). Foram monitorados o perfil clínico, antecedentes familiares, consumo alimentar, atividade física e antropometria. Amostras de sangue foram coletadas após 12 horas de jejum para avaliação das concentrações plasmáticas de CT, TAG, HDL-C, LDL-C, APOAI, APOB, PON1 e glicose. O tamanho da HDL e LDL foi analisado pelo método padronizado Lipoprint®. O conteúdo de LDL(-) foi determinado por ELISA. As medidas Z-scan foram determinadas por meio da difusividade térmica e absorção linear da LDL (1,0 mg/dL de proteína), isolada por ultracentrifugação. Todos as variáveis do estudo foram avaliadas no momento basal e após 8 semanas de intervenção. A adesão à intervenção foi monitorada pela contagem de cápsulas e percentual dos ácidos graxos plasmáticos. Para avaliar a associação das medidas Z-Scan aos marcadores cardiometabólicos, os dados obtidos no momento basal foram submetidos à Análise de Componentes Principais. Resultados: A idade média dos participantes do estudo foi de 51,5 (10,5) anos. A suplementação com ômega-3 promoveu redução significativa de CT, TAG, não-HDL, HDLPEQUENA e LDL(-), além de aumento significativo de HDL-C e HDLGRANDE. O ômega-3 foi mais eficaz na redução dos TAG (29,2 por cento ) quando comparado ao placebo (2,9 por cento ). O Grupo Ômega-3 apresentou aumento de HDLGRANDE (16,9 por cento ) e redução de HDLPEQUENA (-16,3 por cento ) ao final da intervenção, com diferença significativa quando comparado ao Grupo Placebo que apresentou redução de HDLGRANDE (-4,8 por cento ) e aumento de HDLPEQUENA (17,7 por cento ). Não foram observadas diferenças nas medidas Z-scan após a intervenção, porém as medidas se associaram positivamente a Componentes Principais com padrões cardioprotetores da amostra e negativamente a padrões aterogênicos. Conclusão: O ômega-3 demonstrou efeito positivo no perfil lipídico e propriedades aterogênicas das subfrações lipoproteicas. A suplementação com ômega-3 não modificou as medidas Z-scan, no entanto, a técnica demonstrou ser uma ferramenta capaz de se associar a padrões aterogênicos e antiaterogênicos monitorados no presente estudo.

Introduction: The increased of cardiovascular disease prevalence draws attention to the need to adopt effective and inexpensive strategies as preventive measures to reduce risk factors, morbidity and deaths from coronary events. Lifestyle modification is indicated as first alternative to be adopted. In this context the diet stands out and omega-3 polyunsaturated fatty acids benefits on cardiovascular health are largely recognized. Cardiovascular diseases are influenced by several risk factors and the plasma imbalance lipoprotein is considered a crucial independent risk factor. However, there is evidence of the influence of lipoprotein subfractions in cardiovascular risk, based on the physicochemical characteristics of these particles. The development of new techniques able to identify those parameters has been the focus of great scientific interest. Objective: To evaluate the role of omega-3 on HDL and LDL physicochemical characteristics and possible association between Z-scan measurements and cardiometabolic markers in adults. Methods: From a subsample of the study CARDIONUTRI (clinical, randomized, controlled, double blind study with 8-week follow-up) were selected 36 individuals from the Omega-3 Group (3.0g/day of fish oil - 1,11g EPA + 0.69g DHA) and 27 individuals from the Placebo Group (3.0g/day of mineral oil). The clinical profile, family history, dietary intake, physical activity and anthropometry were monitored. Blood samples were collected after 12 hours of fasting to evaluate plasma concentrations of TC, TAG, HDL-C, LDL-C, APOAI, APOB, PON1 and glucose. The HDL and LDL size was analyzed by the standard method Lipoprint®. The levels of LDL (-) was determined by ELISA. The Z-scan measurements were determined by thermal diffusivity and linear absorption of LDL (1.0 mg / dL protein) isolated by ultracentrifugation. All study variables were evaluated at baseline and after 8 weeks of intervention. The intervention accession was monitored by capsule count and percentage of plasma fatty acids. To evaluate the association of the Z-Scan measurements to cardiometabolic markers, the data collected at baseline were subjected to Principal Component Analysis. Results: The average age of individuals were 51.5 (10.5) years. The omega-3 supplementation promoted a significant decreased of TC, TAG, non-HDL, small HDL and LDL(-), and significantly increased HDL-C and large HDL. The omega-3 was more effective in reducing the TAG (29.2 per cent ) when compared to placebo (2.9 per cent ). The Omega-3 Group increased large HDL (16.9 per cent ) and decreased small HDL (-16.3 per cent ) after the intervention, with significant difference when compared to the Placebo Group that decreased large HDL (-4.8 per cent ) and increased small HDL (17.7 per cent ). There were no differences in Z-scan measurements with the interventions, but were observed positively associated the Z-scan measurements with the anti-atherogenic sample patterns and negatively associated with atherogenic sample patterns when the sample was standardized from the Principal Components Analysis. Conclusion: The omega-3 demonstrated positive effect on the lipid profile and atherogenic lipoprotein subfractions. Supplementation with omega-3 did not modify the Z-scan measurements, however, the technique proved to be a tool that can be associated with atherogenic and anti-atherogenic sample patterns monitored in this study.

Lipoproteína de baixa densidade modificada (mLDL) e anticorpos anti-mLDL na aterosclerose / Modified low-density lipoprotein (mLDL) e anticorpos anti-mLDL na aterosclerose

Várias afecções clínicas, incluíndo guadros inflamatórios crônicos, geram condições para que a lipoproteína de baixa densidade (LDL) seja submetida a processo oxidativo, químico e biológico, gerando, assim, partículas modificadas de LDL (mLDL). Esses derivados da LDL estão envolvidos na patogênese da aterosclerose. Diversos componentes da mLDL são biologicamente ativos e uma de suas ações predominantes é a de interagir com as células dos sistema imune, induzindo resposta imune mediada por anticorpos. Essa resposta pode ser benéfica para os indivíduos (por exemplo, protegendo contra efeitos deletérios da mLDL) ou induzir uma reação autoimune relacionada à mLDL, causando alterações patológicas ao paciente. Os avanços no conhecimento das propriedades fisiopatológicas da mLDL e na possibilidade de se utilizar anticorpos como biomarcadores na detecção, na avaliação, no diagnóstico e no acompanhamento da aterosclerose serão discutidos neste artigo.

Biomarcadores de peroxidação lipídica na aterosclerose / Lipid peroxidation biomarkers in atherosclerosis

A aterosclerose é caracterizada por uma resposta inflamatória crônica da parede arterial, iniciada por uma lesão do endotélio, cuja etiologia está relacionada à modificação oxidativa da lipoproteína de baixa densidade. O objetivo deste trabalho é apresentar os principais metabólitos envolvidos nos processos bioquímicos de peroxidação lipídica, discutindo as vantagens e desvantagens dos métodos empregados para a mensuração dos biomarcadores de peroxidação lipídica relacionados com a aterosclerose. A avaliação da oxidação das lipoproteínas pode ser realizada pela determinação dos produtos gerados durante a peroxidação lipídica, como os isoprostanos, hidroperóxidos lipídicos, aldeídos, fosfolípides oxidados e os produtos da oxidação do colesterol. A suscetibilidade das partículas de lipoproteína de baixa densidade à oxidação pode ser avaliada in vitro, após a indução da peroxidação lipídica por azoiniciadores radicalares lipossolúveis, hidrossolúveis, ou mais comumente, pelos íons cobre. Por outro lado, as modificações da lipoproteína de baixa densidade, pela ação das lipoxigenases e peroxidases, ou oxidação não-enzimática, resultam no aumento da carga negativa destas partículas e podem contribuir para a geração in vivo de uma subfração de lipoproteína de baixa densidade minimamente oxidada, denominada lipoproteína de baixa densidade eletronegativa (lipoproteína de baixa densidade). A determinação das concentrações desta partícula pode ser realizada em plasma por cromatografia líquida ou por imunoensaios..Diversos métodos podem ser utilizados para a avaliação dos biomarcadores de peroxidação lipídica in vivo e in vitro, porém, a definição do marcador mais adequado, depende de uma avaliação criteriosa das vantagens, desvantagens e particularidades de cada análise, levando-se em consideração os objetivos do estudo que será conduzido.

Atherosclerosis is characterized by a chronic inflammatory response in the arterial wall triggered by endothelial injury. Its etiology is associated with the oxidative modification of low density lipoprotein. The objective of this work is to present the main metabolites involved in the biochemical process of lipid peroxidation and discuss the advantages and disadvantages of the methods used to measure the lipid peroxidation biomarkers associated with atherosclerosis. Lipoprotein oxidation can be assessed by determining the products generated during lipid peroxidation, such as isoprostanes, lipid hydroperoxides, aldehydes, oxidized phospholipids and products of cholesterol oxidation. The susceptibility of low density lipoprotein particles to oxidation can be assessed in vitro after induction of lipid peroxidation by oil-soluble or water-soluble azo initiators or more commonly by copper ions. On the other hand, low density lipoprotein modification by lipoxygenases and peroxidases or non-enzymatic oxidation increases the negative charge of these particles and may contribute to in vivo generation of a minimally oxidized low density lipoprotein subfraction called electronegative low density lipoprotein (low density lipoprotein). Plasma concentrations of these particles can be determined by liquid chromatography or immunoassays. Many methods can be used to assess lipid peroxidation biomarkers in vivo and in vitro, however determination of the most suitable biomarker depends on a minute assessment of the advantages, disadvantages and particularities of each analysis, bearing in mind the objectives of the study that will be performed.

Frutos tropicales mínimamente procesados: potencial antioxidante y su impacto en la salud / Minimal processing of tropical fruits: antioxidant potencial and impact on human health

El desarrollo de tecnologías suaves no-térmicas y efectivas, o su combinación, puede permitir ofrecer al consumidor frutos tropicales frescos cortados, microbiológicamente seguros, con valor nutricional y calidad sensorial lo más cercanos al producto intacto. Frutos tropicales tales como mango, papaya, piña y cambur almacenados a bajas temperaturas en combinación con atmósferas controladas y/o modificadas conservan su calidad comercial hasta por 10 días para el caso de mango y por 8 y 7 días para papaya y piña, respectivamente. En estos frutos han sido muy pocos los estudios en relación a los efectos del procesamiento mínimo sobre su composición nutricional y potencial antioxidante, esto último atribuido a componentes bioactivos tales como la vitamina C y E, carotenoides y polifenoles, los cuales han sido fuertemente asociados a la prevención de ciertas enfermedades crónico-degenerativas. Estos componentes bioactivos se encuentran en cantidades significativas en los frutos tropicales y a la fecha solo ha sido evaluada su actividad antioxidante medida como su capacidad de absorción de radical oxígeno (ORAC) en los frutos enteros, reportándose valores entre 7 y 11 µmol ET/g. Se desconoce en gran medida cómo se afectan estos valores una vez que los frutos han sido procesados y almacenados. En este trabajo se revisan algunos aspectos relacionados con el procesamiento mínimo de frutas tropicales y el efecto que éste tiene sobre sus constituyentes antioxidantes, además se resalta la importancia de la evaluación de la actividad antioxidante total en frutos frescos cortados y su acción biológica en vivo.

Comparison of two methods [precipitation manual and fully automated enzymatic] for the analysis of HDL and LDL cholesterol

To compare accuracy and throughput time for the measurement of HDL and LDL cholesterol by manual precipitation and fully automated enzymatic methods. Fifty, serum samples collected over a 4 months period [February - May 2004] were analyzed for HDL and LDL cholesterol by two different methods i.e. precipitation manual and automatic enzymatic method in the section of chemical pathology, Department of Pathology and Microbiology, Aga Khan University Hospital, Karachi Pakistan. The mean standard deviation for HDL Cholesterol by precipitation method and automated method were 43.12'8.97mg/dl and 43.86'10.34mg/dl respectively [p-value = 0.301]. The mean standard deviation for LDL cholesterol by precipitation method and automated method were 111.76'25.57mg/dl and 111.8'28.41mg/dl respectively [p-value = 0.981]. The calculated "t" and "F" value for HDL-C was 0.0172 and 0.75 respectively, and calculated "t" and "F" values for LDL-C were 0.047 and 0.809 respectively. Average time for manual method was 45 minutes and automation 20 minutes. Both the precipitation [manual] method and the automated method provide reliable, precise and accurate results. In both the methods "t" and "F" values were less than critical. Automated method provide high throughput and are less labor intensive. The choice of method can depend on laboratory facilities and workload

Efecto de la suplementación con las vitaminas B12, B6 y ácido fólico en los niveles de homocisteina y lípidos plasmáticos en pacientes con hiperlipoproteinemia secundaria tipo IV / Effect of the supplementation of vitamins B12, B6 and folic acid on homocysteine and plasmatic lipics in patients with hyperlipoproteinemic secondary type IV

Los casos de hiperlipoproteinemia secundaria tipo IV se manifiestan por una marcada elevación de triglicéridos, colesterol normal o elevado y homocisteina ligeramente elevada. Se investigó el efecto del suplemento de las vitaminas B12, B6, y ácido fólico, sobre los niveles de homocisteina y lípidos plasmáticos, en 24 pacientes masculinos, edad de 35-68 años inclusive, con hiperlipoproteinemia secundaria tipo IV e isquemia del miocardio, sin previo tratamiento con hipolipemiante. Los pacientes fueron suplementados con dosis terapéuticas en tabletas de vitamina B12, (500 µg/día), B6, (600 mg/día) y ácido fólico (20 mg/día), durante 120 días. Se determinó homocisteina, trigliceridos, colesterol total y fraccionado, a (basal), 30, 60, 90 y 120 días. Se aplicaron análisis estadísticos descriptivos, coeficiente de correlación de Pearson, prueba "t", grado de confianza p<0,005; con programa estadístico SPSS versión 8.0. Los resultados mostraron disminución de homocisteina (basal) de 17,1 µmol/L a 13,18 ± 0,83 µmol/L. Los triglicéridos (TG), colesterol total (CT), lipoprote´nas de baja densidad (LDL), lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) disminuyeron (21,8 mg/dl; 8,5 mg/dl; respectivamente) por µmol/L de homocisteína reducido, con (p<.001) para los triglicéridos, al final del período experimental. Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) incrementaron 1,1 mg/dl y el riesgo coronario disminuyó en un 24 por ciento. Se concluye que dosis terapéuticas de las vitaminas B12, B6 y ácido folico, pueden ser efectivas para reducir las concentraciones de homocisteina y lípidos en plasma, con una disminución del riesgo coronario, en este tipo de pacientes, sin que ocurran efectos colaterales de neuropatías

Avaliação do metabolismo de uma emulsão lipídica rica em colesterol em pacientes com obesidade grau III / Metabolism of a lipid emulsion resembling low-density lipoprotein in patients with obesity grade III

Emulsões artificiais semelhante as lipoproteínas plasmáticas são usadas na avaliação do metabolismo da lipoproteína de baixa densidade(LDL) porém em obesos grau III esse metabolismo lipídico ainda não é bem conhecido.O objetivo do estudo foi avaliar a cinética de uma emulsão rica em colesterol que se liga a receptores de LDL e mimetiza o comportamento do colesterol endógeno,em obesos grau III.A emulsão artificial de LDL foi marcada com colesterol éster-[14C] e triglicérides-[3H], injetada em 10 obesos grau III e 10 controles / Artificial emulsions of defined composition resembling the lipidic structure of the plasma lipoproteins have been used to evaluate low- density lipoprotein (LDL) metabolism.In morbid obesity,the LDL metabolism is poorly understood.The purpose of this study was to evaluate the kinetic of a cholesterol-rich emulsion that binds to the LDL receptors,called LDE, in a group of morbid obesity.LDE was labeled with [14C]-cholesteryl ester and [3H]-triglycerides and injected intravenously into 10 patients with morbid obesity and 10 controls...

Alterações do metabolismo lipídico no paciente com síndrome metabólica / Lipid metabolic alterations in the patient with metabolic syndrome

A síndrome metabólica caracteriza-se pela presença, no mesmo indivíduo, de uma constelação de desordens metabólicas, todas reconhecidas como fatores de risco para o desenvolvimento da doença aterosclerótica. Os portadores da síndrome metabólica apresentam o chamado fenótipo lipídico aterogênico, composto por hipertrigliceridemia, aumento dos níveis séricos da apolipoproteína B, redução do HDL-colesterol, particularmente às custas do HDL2-colesterol, nível de LDL-colesterol em geral aceitável, entretanto com aumento da população de LDLs pequenas e densas, mais aterogênicas. Esse perfil é compartilhado por outras doenças, como diabetes do tipo 2 e hiperlipidemia combinada familial, todas tendo como provável substrato comum a resistência à insulina. Acredita-se que as alterações lipídicas comuns a essas doenças contribuam sobremaneira para o aumento do risco dedoença aterosclerótica precoce encontrado nessas situações. Sabe-se que o desenvolvimento da síndrome metabólica com seus componentes depende de fatores genéticos e ambientais, o que tem sido objeto de intensa pesquisa.

Comportamiento del perfil lipídico en una muestra de población adulta de la ciudad de Maracaibo / Behavior of the profile lipid in a specimen of population adult of the city of Maracaibo

Las enfermedades isquémicas representan un gran porcentaje de morbi-mortalidad en la población, Investigaciones han establecido la relación perfil lipídico alterado-mayor riesgo para enfermedades isquémicas. Estas cifras corresponden en su mayoría a poblaciones de adultos en otras regiones, por lo cual se considero necesario conocer el comportamiento para estos grupos etarios en nuestra región y el país. Se escogieron 186 individuos de ambos sexos (94 hombres y 92 mujeres) mayores de 40 años de la ciudad de Maracaibo. Fueron divididos en grupos etarios (40 a 49 a, 50 a 59a y 60a y más) y sexo (H y M). Se determinaron concentraciones de Colesterol Total (Ct), Triglicéridos (TG) y HDL colesterol (cHDL), a partir del suero; para el resto de las fracciones fue utilizada la formula de Friedewald. Las diferencias se consideraron como significativas cuando el valor de p<0,05. El Ct mostró diferencia significativa con relación al sexo en el grupo de 60a y más (176,9 ± 4,7 mg/dl-H Vs 200,1 ± 4,9 mg/dl-M). También entre hombres para cada grupo etario (193,5 ± 9,0 mg/dl Vs 192,2 ± 11,2 mg/dl Vs 176,9 ± 4,7 mg/dl). Niveles de TG mostraron significancia entre grupos etarios para hombres (221,15 ± 21,84 mg/dl Vs 170,96 ± 17,94 mg/dl Vs 131,45 ± 6,87 mg/dl), y comparando sexos en grupos de 40-49a (221,1 ± 21,8 mg/dl-H Vs 149,8 ± 9,7 mg/dl-M) y 60 años y más (131,4 ± 6,8 mg/dl-H Vs 157,7 ± 9,8 mg/dl-M. Niveles de cHDL mostraron diferencias entre sexos por cada grupo etario, 40-49a (39,3 ± 1,5 mg/dl-H Vs 48,3 1,7 mg/dl-M), 50-59a (37,3 ± 1,21 mg/dl-HVs 45,2 ± 1,7 mg/dl-M), 60a y más (41,4 ± 1,4 mg/dl-HVs 45,8 ± 1,21 mg/dl-M). Concentraciones de VLDL mostraron diferencia en los tres grupos etarios para hombres (44,2 ± 4,3 mg/dl Vs 34,1 ± 3,5 mg/dl Vs 26,3 ± 1,3 mg/dl), entre sexos para grupos 40-49a (44,2 ± 4,3 mg/dl-H Vs 29,9 ± 1,9 mg/dl-M) y 60a y más (26,2 ± 1,3 mg/dl-H Vs 31,5 ± 1,9 mg/dl-M). El estudio mostró descenso en niveles de Ct y TG en grupos etarios de 60a y más; al igual que diferencias significativas en los niveles de cHDL entre sexos para todos los grupos etarios estudiados

Oxidized LDL metabolites with high family risk for premature cardiovascular disease.

OBJECTIVE: Considering the importance of primary prevention of Cardiovascular Disease (CVD) from childhood, especially in children with high family risk for premature atherosclerosis, and also the importance of oxidized LDL in the process of atherosclerosis, the main metabolites of ox-LDL i.e. Malondialdehyde (MDA) and Conjugated diene (CDE) have been measured in children of high risk families and compared with a control group. METHODS: Children and adolescents (6-18 years) of parents with premature myocardial infarction (MI < or = 55 y in men and < or = 65 y in women), were selected as the case group. The control group included neighbors of the case group matched for age and socioeconomic status. All samples have been selected by simple random sampling. Both the case and control groups were divided in two subgroups: those with a total cholesterol and/or LDL-C > or = 95th centile and those with normal lipid levels. Each subgroup consisted of 32 subjects, so 128 subjects were studied (64 in the case and 64 in the control group). MDA and CDE were measured by spectrophotometry using molar absorbivity. Data were analyzed by SPSSv10/Win software using ANOVA, Bonferroni, Scheffe-Duncan, Tukey-HSD, and the Student's t-test. RESULT: The mean MDA value in the case and control groups was significantly different (1.84 +/- 0.43 vs. 1.67 +/- 0.41 micromol/L, p=0.03), but this difference was not significant regarding the mean CDE level (0.50 +/- 0.05 vs. 0.47 +/- 0.04 micromol/L, p>0.05). The mean MDA level in the case group with hyperlipidemia was significantly higher than that in the case group without hyperlipidemia (1.985 +/- 0.516 vs. 1.690 +/- 0.366, micromol/L, P=0.02) and also higher than control group with or without hyperlipidemia (1.985 +/- 0.516 vs. 1.720 +/- 0.389, 1.615 +/- 0.429 micromol/L respectively, P<0.05). The mean CDE level in the case group with hyperlipidemia was significantly higher than the case group without hyperlipidemia (0.542 +/- 0.034 vs. 0.494 +/- 0.049 micromol/L, P=0.04) and higher than the control group with or without hyperlipidemia (0.542 +/- 0.034 vs. 0.464 +/- 0.051, 0.484 +/- 0.048 micromol/L respectively, p<0.05). In case boys with hyperlipidemia, the mean MDA (2.03 +/- 0.2 micromol/L) and the mean of CDE (0.56 +/- 0.04 micromol/L) was significantly higher than other subgroups (P<0.05). CONCLUSION: Considering the increased susceptibility of LDL to oxidation in children with high family risk for premature CVD, special attention should be paid to consumption of foods and seasoning containing antioxidants from childhood especially in high risk families.

Las alteraciones lipídicas en el infarto cerebral / Lipid alterations in cerebral infarction

Se realizó un estudio prospectivo tipo caso-control en pacientes y controles, para definir los principales desórdenes lipídicos en pacientes con infarto cerebral y comparar la relación de estos con factores de riesgo vascular. Se observaron valores significativamente más elevados de triglicéridos, lipoproteínas de baja densidad e índice aterogénico, en los pacientes respecto de los controles. No hubo diferencias para el colesterol total ni las lipoproteínas de muy baja densidad entre los 2 grupos. La hipertensión arterial como factor de riesgo se asoció con valores más bajos de lipoproteínas de alta densidad, y más elevados de lipoproteínas de baja densidad, triglicéridos, lipoproteínas de muy baja densidad e índice aterogénico. No se encontró relación entre la hipertensión arterial y el colesterol total. Se concluyó que era necesario controlar los lípidos en el infarto cerebral

Corneal arcus associated with dyslipidemia.

A cross sectional study based on 243 subjects with an age range of 20-63 years, was conducted to assess the prevalence of corneal arcus and the association between corneal arcus and dyslipidemia which is a coronary heart disease risk factor. The presence of corneal arcus was determined by hand-held slitlamp, serum lipids and serum plasma glucose collected on the same day as corneal arcus detection. Total cholesterol (CHOL), triglyceride (TG) and high density lipoprotein (HDL) were measured by enzymatic procedure, and low density lipoprotein (LDL) was estimated by the Friedewald formula. The prevalence of corneal arcus was divided into 3 age groups, 20-29 years (0%), 30-49 years (male 41.5%, female 26.13%) and 50-69 years (male 86.2%, female 59.1%) In the 30-49 year, female group, those with corneal arcus had higher serum LDL and total cholesterol concentration than those without corneal arcus. The mean difference of LDL was 22.21 mg/dl (p=0.001) and total cholesterol was 30.95 mg/dl (p=0.000). In the 30-49 year, male group people with corneal arcus had a lower serum HDL concentration than those without corneal arcus and the mean difference of the HDL was 8.6 mg/dl (p=0.014). There was no difference for corneal arcus and serum lipid in the 50-69 years group in both sexes. No association between corneal arcus and fasting plasma glucose was found in all ages and both sexes. It is concluded that while corneal arcus is primarily an aged-related change, if present in people under 50 years it should be considered for dyslipidemia which is one of the risk factors for coronary heart disease.

Influência das isoflavonas extraídas da soja na hipercolesterolemia e na aterosclerose experimental induzida pela caseína / Isoflavones influences extracted of soy in the experimental hypercholesterolemia and atherosclerosis by casein-fed

A oxidação da lipoproteína da baixa densidade (LDL) é um evento crucial na aterogênese. Os antioxidantes, que protegem a LDL contra a oxidação, potencialmente, podem exercer efeitos benéficos quanto ao desenvolvimento e progressão da aterosclerose. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito das isoflavonas da soja, que apresentam atividade antioxidante, sobre a formação da fração da LDL oxidada in vivo, denominada LDL- e anticorpos anti-LDL-, a colesterolemia e a formação de lesões ateroscleróticas, em coelhos com hipercolesterolemia induzida por uma dieta contendo caseína. Coelhos machos da raça Nova Zelândia (n=15) foram divididos randomicamente em três grupos, a saber: grupo X, que consumiu...